上学的时候也装过层析柱，由于技术不过关，装出来的柱子里面经常有气泡，实验效果不好。柱子装填的效果对柱效影响很大。如何使用色谱柱使实验顺利进行，这就需要对色谱柱做一下深入的了解了。
一般的液相色谱柱由柱管、柱头螺母、死堵、筛板、还有里面的填料组成。不同品牌的构造略有不
柱的分类2液相色谱柱分类多样主要有以下分类方式
按照固定相基质分：
无机氧化物（常用硅胶、氧化铝）、聚合物基质（常用DVB、PS-DVB、PHAM等）和全石墨化碳色谱柱等。
按结构和形状分：
全多孔硅胶柱和核壳柱，无定型和球形，整体柱。
按分离模式分：
正相、反相、离子交换、体积排阻、亲和、手性等。
按照分离规模和色谱柱尺寸分：
制备柱、分析柱、微型柱、毛细管柱等。
色谱柱的类型和构型（粒径、内径、长度、碳载量、孔径等）选择通常有分离的目的决定，对特定类型的色谱柱，不同品牌不同系列之间差异很大。
表征色谱柱性能的参数主要有：理论塔板数、不对称因子、对两种不同溶质的选择性、色谱柱的反压、保留时间的重现性、键和相浓度、色谱柱的稳定性等。一般色谱柱出厂COA报告包含其中比较关键的项目。
我们常见的色谱柱品牌有waters、安捷伦、赛默飞、岛津、shodex、大赛璐、还有被大曹三耀收购的资生堂，国内品牌比较出名的就是月旭、依利特了。
我们再看看各种各样的键和相都是啥
这么多的键和相到底应该怎么选，有没有规律呢，必须有啊，往下瞅瞅~
又想起了化学老师那句万能的箴言：“结构决定性质，性质决定用途。”结构和性质还决定了这伙计需要用什么柱子分离。
了解被分离物有何区别？有无可电离集团？电离常数？PH如何影响色谱分析？比如下图ＰＨ对分离的影响。
常规的硅胶基质色谱柱不能耐受高PH，可以选择杂化硅胶颗粒或者聚合物基质的色谱柱，多点键和的色谱柱在高PH下也会比单点键和的色谱柱寿命更长。下图便是某位小姐姐家的色谱柱在高PH下硅胶溶解的图片。
１、拿到色谱柱后先阅读说明书，了解色谱柱的具体性能：耐受温度、耐受ＰＨ等。以及色谱柱的冲洗和保存条件。经过柱校测试确认色谱柱本身没有问题后方可正常使用。
２、样品充分前处理，确保样品的洁净；使用保护柱或在线过滤器，根据实际情况更换保护柱芯或滤片。
３、避免压力和温度的急剧变化及任何机械震动。
４、应逐渐改变溶剂的组成，特别是反相色谱中如果流动相中使用了缓冲盐，避免出现盐析。
５、选择使用适宜的流动相（尤其是PH），以避免固定相被破坏，PH过低共价键断裂，键和相水解；PH过高硅胶溶解。
６、色谱柱使用过程中，如果压力升高，或出现污染，选择适当的条件冲洗或反冲。
适用于C18、C8、C4、C1、苯基、PFP、AQ等
使用至少20倍柱体积的含有≥30%谁的极性邮寄溶剂（如乙腈）作为流动相除去柱子中的缓冲盐；使用至少20倍柱体积的含有95%极性邮寄溶剂（如乙腈）冲洗色谱柱。
污染物的去除常规星期后柱校没有明显恢复时，使用50%异丙醇／乙腈以低流速清洗20倍柱体积以除去污染物。（以上操作可根据实验室自身SOP视情况而定，此方法仅为赛默飞针对自己品牌的反相色谱柱冲洗的参考意见）
适用于氨基柱、氰基柱
常规清洗：乙腈：水＝60:40条件对色谱柱进行冲洗，清洗时不建议水相比例超过40%，过高使用水相容易导致键和相水解。
色谱柱再生：当色谱柱经过长期使用，柱校降低时，可以对色谱柱进行再生，乙腈：水（水中加入0.05%氨水）＝60:40条件冲洗30倍柱体积。（以上操作可根据实验室自身SOP视情况而定，此方法仅为赛默飞针对自己品牌的色谱柱冲洗的参考意见）
适用于离子交换柱SCX、SAX冲洗方法
日常冲洗：用100%水冲洗30个柱体积除盐，然后用20%甲醇或乙腈冲洗20个柱体积后保存在20%甲醇或乙腈中。
长期保存：用100%水冲洗30个柱体积去除盐，然后用50%乙腈；50%水冲洗20个柱体积后保存在50%乙腈：50%水中。
再生：先用高浓度的缓冲盐（不超过１Ｍ），然后再用100%水洗，100%乙腈或甲醇冲洗，再用20%乙腈或甲醇保存。（以上操作可根据实验室自身SOP视情况而定，此方法仅为赛默飞针对自己品牌的色谱柱冲洗的参考意见）
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